久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 上海恒遠(yuǎn)重點(diǎn)分析如何選擇一抗二抗

上海恒遠(yuǎn)重點(diǎn)分析如何選擇一抗二抗

更新時(shí)間:2018-03-07   點(diǎn)擊次數(shù):2557次

    根據(jù)我公司技術(shù)員的總結(jié)了解,不少客戶對一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱,您是否也正面對此問題而不知怎樣做呢?在今天的內(nèi)容里,上海恒遠(yuǎn)重點(diǎn)分析。

        

    通常情況下,某一特定的實(shí)驗(yàn)中可能同時(shí)有幾種二抗可供選擇,如何能選擇到該實(shí)驗(yàn)的二抗,需要綜合以下幾個(gè)方面進(jìn)行考慮:
    *、一抗的物種來源
    一抗是在什么物種來源的,相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。例如,如果一抗是在小鼠體內(nèi)制備的,那么你就應(yīng)當(dāng)選擇抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔體內(nèi)制備的,那么二抗就應(yīng)當(dāng)是抗兔的抗體。至于二抗本身是在什么動物中制備的對二抗的質(zhì)量并無明顯的影響。

第二、一抗是屬于哪個(gè)類或亞類
    二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體.

    單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗體。

    如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2b,IgG3),那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以選擇抗IgG1的二抗,此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。

    如果您不知道一抗是哪一類別或亞類,那么抗小鼠IgG是一個(gè)不錯(cuò)的選擇,因?yàn)榇朔N抗體可以識別大多數(shù)類型的IgG免疫球蛋白。

下面總結(jié)了幾種具有不同特異性的二抗:
    針對整個(gè)抗體分子(H+L)具有特異性:如anti-IgG(H+L),此類抗體既可以與抗體的重鏈結(jié)合也可以與輕鏈結(jié)合,即與抗體分子的 Fc,F(xiàn)(ab’)2/Fab部分均可反應(yīng),anti-IgG(H+L)也可以與其他免疫球蛋白家族反應(yīng),因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥季哂邢嗤妮p鏈。

    針對Fab片段具有特異性:這類抗體與重鏈輕鏈均可以結(jié)合,由于它們可以與輕鏈反應(yīng),它們同時(shí)也已和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應(yīng)。

    這對Fc片段或重鏈具有特異性:這類抗體和重鏈的Fc部分反應(yīng),一次它們是類別特異性的(即gamma鏈特異性抗體只與IgG反應(yīng),mu鏈特異性抗體只識別IgM,依此類推)。

    輕鏈特異性:與所有類別的抗體反應(yīng),因?yàn)樗蓄悇e的抗體均具有相同的lambda鏈或kappa鏈。

    經(jīng)過吸附處理的二抗:不同來源的免疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu),抗一個(gè)物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng),一次有些二抗經(jīng)過了動物或人類IgG吸附處理,以減少非特異性背景。例如,如果是小鼠的組織或細(xì)胞,那么選擇經(jīng)小鼠血清或IgG吸附處理過的二抗可以減少非特異性結(jié)合。但是此種抗體識別表位的數(shù)量被大大減少。

         
    第三、選擇哪種形式的二抗,是整個(gè)IgG分子,F(xiàn)(ab’)2片段,還是Fab片段?整個(gè)IgG分子:此種抗體適用于多數(shù)情況。
    F(ab’)2片段:該種抗體是由兩個(gè)靠二硫鍵連接的用于結(jié)合抗原的Fab片段組成,這些抗體用在特定的情況中,如需要避免抗體與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合的情況。

    Fab片段:它們只有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn),一般用來封閉內(nèi)源性免疫球蛋白。
第四、選用耦聯(lián)有哪種探針的二抗?
    一般來講,耦聯(lián)到二抗上的探針主要有酶(辣根過氧化酶HRP和堿性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),熒光基團(tuán)(FITC, RRX, TR, PE)和生物素。選用哪種探針的二抗主要取決于具體的實(shí)驗(yàn)。對于western blot和ELISA,zui常用的二抗是酶標(biāo)二抗,而細(xì)胞或組織標(biāo)記實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞免疫化學(xué),組織免疫化學(xué),流式細(xì)胞術(shù))中通常使用熒光基團(tuán)標(biāo)記的二抗,免疫組化中也可以使用辣根過氧化酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的二抗。如果想要更大程度的放大檢測信號,可以使用biotin/avidin檢測系統(tǒng)。

第五、抗體的純度:
    親和層析純化的抗體一般更受人們歡迎,因?yàn)檫@些產(chǎn)品的純度zui高,產(chǎn)生的非特異性背景zui少。但是有些情況下也要考慮到純化過程中損失的IgG部分,因?yàn)槠渲泻杏H和力很高的抗體,尤其是當(dāng)目的抗原存在的量很小的時(shí)候,高親和性的IgG部分就顯得尤為重要。

聯(lián)


在线播放免费人成毛片乱码 | 亚洲av无码不卡| 18禁裸男晨勃露j毛免费观看| 无码人妻精品一区二区三区东京热| 欧美大肥婆大肥bbbbb| 美女网站免费观看视频| 中文字幕人妻中文av不卡专区| 特黄大片又粗又大又暴| 国产精品无码无在线观看| 激情综合色综合啪啪开心| 色橹橹欧美在线观看视频高清| 女人扒开屁股桶爽30分钟| 国产乱妇乱子视频在播放| 国产精品成人va在线观看| 精品无码国产一区二区三区麻豆| 人人做人人爽人人爱| 伊人久久大香线蕉综合影院首页| 国产艳妇av在线| 国产黄大片在线观看| 熟妇人妻中文av无码| 国产青草视频在线观看| 西西444www无码大胆| 国产aⅴ无码专区亚洲av| av狠狠色丁香婷婷综合久久| 十八禁视频在线观看免费无码无遮挡骂过| 最好看2019高清中文字幕视频| 国产av夜夜欢一区二区三区| 丁香五月缴情在线| 亚洲国产一区二区三区在线观看| 丰满少妇被粗大的猛烈进出视频| 久久久久免费看成人影片| 亚洲va久久久噜噜噜久久天堂| 免费无遮挡无码永久在线观看视频| 摸进她的内裤里疯狂揉她动图视频| 精品香蕉久久久午夜福利| 朝鲜女人大白屁股ass| 亚洲av永久无码精品网站色欲| 国产成人精品午夜二三区波多野 | 国产成人无码a区在线观看导航| 伊人天堂av无码av日韩av| 亚洲成a人v欧美综合天堂麻豆 |