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胚珠培養(yǎng):
概念:在無菌條件下對授粉的子房取出胚珠進行培養(yǎng)的過程。有時也把胚珠連同胎座一起取下來培養(yǎng)。
優(yōu)點:胚珠培養(yǎng)可以解決象蘭科植物成熟胚較小不易培養(yǎng)的問題。另一方面在未受精的胚珠培養(yǎng)中,可誘發(fā)大孢子發(fā)育成單倍體,用于單倍體育種。
接種和培養(yǎng)基:從花中取出子房進行表面消毒,在無菌條件下進行解剖,取出胚珠,放在培養(yǎng)基上培養(yǎng);多用Nistch培養(yǎng)基,也可采用MS、N6、B5等培養(yǎng)基。
注意:關鍵是選擇胚的發(fā)育時期,實驗證明發(fā)育到球形胚期的胚珠較易培養(yǎng)成功。另外可取用帶胎座甚至帶部分子房的胚珠進行培養(yǎng)。
胚乳培養(yǎng):
概念:指對由兩個單倍的極核和一個單倍的精子結合而成的三倍體組織的培養(yǎng)??色@得無子結實的三倍體植株,進而可將它加倍成六倍體植株。
接種和培養(yǎng)基 :取授粉4~8天后的幼果,常規(guī)消毒后,在無菌條件下切開果實,取出種子,小心分離出胚乳。接種在培養(yǎng)基上;
培養(yǎng)過程:
I)接入MS、White等培養(yǎng)基,附加2,4-D或NAA 0.5~2.0,BA0.1~1.0。在25~27度和黑暗條件或散射光下培養(yǎng),約6-10天胚乳開始膨大,形成愈傷組織;
II)轉入分化培養(yǎng)基,MS培養(yǎng)基附加0.5~3.0 mg/l的BA及少量的NAA。使愈傷組織長出芽。
III)切下不定芽,插入生根培養(yǎng)基中,光下培養(yǎng)10~15天,切口處可長出白色的不定根。
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