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開學季討論:牛血清實驗操作步驟與材料需求

更新時間:2018-09-05   點擊次數(shù):1530次

    牛血清中IgG、IgA、IgM的測定。本試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量。以下為單向瓊脂擴散試驗的具體操作辦法,為需要者提供參考,歡ying來dian咨詢我司產品的具體價格。


·步驟
  1.稀釋參考血清及待檢血清:參考血清用0.5ml蒸餾水溶解后使用,參考血清、待檢血清稀釋按要求進行。
  2.加樣:將上述稀釋參考血清分別滴入相應的抗體免疫板的一排孔內,其余孔滴加待檢的稀釋血清,每個檢樣加兩個孔,每孔滴加10微升。
  3.繪制標準曲線及血清標本中IgG、IgA、IgM定量測定:測量沉淀環(huán)直徑。
    這種沉淀環(huán)直徑與抗原含量的關系不是直線相關,而是對數(shù)關系,這種關系有兩種計算方

法:
  1.Mancini曲線-適用于大分子抗原和長時間擴散的結果處理。使用方格計算紙劃線,沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關系。
  2.使用半對數(shù)紙劃線,濃度的對數(shù)與沉淀環(huán)之間呈線性關系。公式表示:logC/d=K。
    終結論:免疫球蛋白的含量,不同批號的參考血清其免疫球蛋白含量不一。

 

·材料需求
    IgG、IgA、IgM免疫板、參考血清、待檢血清、微量加樣器、量尺、紗布、生理鹽水、帶蓋方盤。

       

聯(lián)


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