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開學(xué)季討論:牛血清實(shí)驗(yàn)操作步驟與材料需求

更新時(shí)間:2018-09-05   點(diǎn)擊次數(shù):1243次

    牛血清中IgG、IgA、IgM的測(cè)定。本試驗(yàn)主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補(bǔ)體成份的含量。以下為單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的具體操作辦法,為需要者提供參考,歡ying來dian咨詢我司產(chǎn)品的具體價(jià)格。


·步驟
  1.稀釋參考血清及待檢血清:參考血清用0.5ml蒸餾水溶解后使用,參考血清、待檢血清稀釋按要求進(jìn)行。
  2.加樣:將上述稀釋參考血清分別滴入相應(yīng)的抗體免疫板的一排孔內(nèi),其余孔滴加待檢的稀釋血清,每個(gè)檢樣加兩個(gè)孔,每孔滴加10微升。
  3.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線及血清標(biāo)本中IgG、IgA、IgM定量測(cè)定:測(cè)量沉淀環(huán)直徑。
    這種沉淀環(huán)直徑與抗原含量的關(guān)系不是直線相關(guān),而是對(duì)數(shù)關(guān)系,這種關(guān)系有兩種計(jì)算方

法:
  1.Mancini曲線-適用于大分子抗原和長(zhǎng)時(shí)間擴(kuò)散的結(jié)果處理。使用方格計(jì)算紙劃線,沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系。
  2.使用半對(duì)數(shù)紙劃線,濃度的對(duì)數(shù)與沉淀環(huán)之間呈線性關(guān)系。公式表示:logC/d=K。
    終結(jié)論:免疫球蛋白的含量,不同批號(hào)的參考血清其免疫球蛋白含量不一。

 

·材料需求
    IgG、IgA、IgM免疫板、參考血清、待檢血清、微量加樣器、量尺、紗布、生理鹽水、帶蓋方盤。

       

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