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重點分析:ELISA試劑盒洗滌的兩大方法

更新時間:2018-10-24   點擊次數(shù):1949次

    ELISA實驗中為什么要洗滌?這一步驟有那么重要嗎?
    洗滌雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻也決定著實驗的成敗。ELISA靠洗滌來達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
     
重點分析:ELISA試劑盒洗滌的兩大方法
一、浸泡式
    1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
    2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
    3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
    4.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
    5.重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
二、流水沖洗式
    初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。

     

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