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干貨分享:LB培養(yǎng)基怎么配制?

更新時間:2020-09-09   點擊次數(shù):21344次

LB培養(yǎng)基,是微生物學實驗中常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)大腸桿菌等細菌,其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的 LB 培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。

盡管該培養(yǎng)基的名稱被廣泛解釋為Luria-Bertani 培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說法,這個名字來源于英語的 lysogeny broth,即溶菌肉湯。

LB培養(yǎng)基的配制:

1.成分

胰蛋白胨(tryptone)10g

酵母提取物(yeast extract)5g

氯化鈉(NaCl)10g

固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g

加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)pH至7.2,121℃滅菌30min


2.配制方法

①稱量 分別稱取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。

②溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。

③調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。

④定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。

⑤加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補足失水。

⑥分裝、加塞、包扎。

⑦高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。

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