久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 技術(shù)快訊:石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)具體步驟

技術(shù)快訊:石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)具體步驟

更新時(shí)間:2021-01-18   點(diǎn)擊次數(shù):1430次

     1.石蠟切片脫蠟至水:(石蠟切片染色前應(yīng)置 60℃ 1 小時(shí)) 。

    ① 二甲苯 、II,各 10 分鐘。
    ② 梯度酒精:100%,2 分鐘 95%,2 分鐘 80%,2 分鐘 70% 2 分鐘。
    ③ 蒸餾水洗:5 分鐘,2 次(置于搖床)。
 
    2.過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化物酶:3%H2 O2 ,室溫 10 分鐘(避光) 。
 
    3.蒸餾水洗:5 分鐘,2 次(置于搖床) 。
 
    4.抗原修復(fù):根據(jù)待檢測的抗原,選擇適當(dāng)?shù)姆椒ā?/span>
 
    附:抗原修復(fù)液(10mMpH 6.0 枸櫞酸鈉緩沖液)的配制:① 儲(chǔ)備液的配制:A 液:枸櫞酸三鈉- 2H2O 29.41g + 蒸餾水 1000ml;B 液:枸櫞酸 21g + 蒸餾水 1000ml;② 工作液的配制:A 液 82ml+ B 液 18ml+ 蒸餾水 900ml
 
    抗原修復(fù)的方法:
     ① 高壓鍋處理技術(shù):枸櫞酸鈉緩沖液(10mM,PH6.0),淹沒切片,蓋上鍋蓋,高壓鍋內(nèi)煮沸,上汽 3 分鐘后緩慢冷卻(可用自來水在高 壓鍋外沖,以助冷卻) 。
 
    ② 微波處理技術(shù):用塑料切片架,置于塑料或耐溫玻璃容器內(nèi),枸櫞酸 鈉緩沖液淹沒切片,選擇中高或高檔,5 分鐘;取出并補(bǔ)充已預(yù)熱的 枸櫞酸鈉緩沖液; 再選擇中高或高檔,5分鐘(.*佳溫度為 92 95℃)
 
    ③ 酶消化處理。
 
    抗原修復(fù)的注意事項(xiàng):① 組織不能干。 ② 選擇抗原修復(fù)方法要因抗體而異。 ③ 該方法主要用于 10%福爾馬林固定、石蠟包埋組織。④ 抗原修復(fù)后至 DAB 顯色的過程中,均需用 PBS 緩沖液。
 
    5.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床) 。
 
    6.正常血清封閉:從染片缸中取出切片,擦凈切片背面水分及切片正面組織周圍的水分 (保持組織呈濕潤狀態(tài),)滴加正常山羊或兔血清 (與第二抗 體 同源動(dòng)物血清)處理,37℃,15 分鐘。
 
    附:正常血清配制 ( 或按試劑盒規(guī)定的濃度配制):按 1:20比例,用 PBS 配制,每張切片需要量按 50μ+5μl (10%拋灑量) 計(jì)算。
 
    7.滴加抗體:用濾紙吸去血清,不洗,直接滴加抗體,37℃ 2 小時(shí)(也可置于 4℃冰箱過夜) 。
 
    8.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床) 。
 
    9.滴加生物素化的二抗,37℃,40 分鐘。
 
    10.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床) 。
 
    11.滴加三抗 (SAB 復(fù)合物) ,37℃,40 分鐘。
 
    12.PBS:5 分鐘,2 次(置于搖床) 。
 
    13.DAB 顯色,鏡下觀察,適時(shí)終止(自來水沖終止) 。
 
    附:DAB 的配制① 儲(chǔ)備液(DAB 25mg/ml)的配制:DAB 250mg + PBS 10ml,待*溶解后分裝成 1ml,100μl,50μl ,20μ l 等,-20℃,凍存。② 工作液:DAB 儲(chǔ)備液 20μl + PBS 1000μl + 3% H2O2 5μl
 
    14.自來水(細(xì)水)充分沖洗。
 
    15.蘇木素復(fù)染,室溫,30 秒,自來水沖洗。
 
    16.自來水沖洗返藍(lán),15 分鐘。
 
    17.梯度酒精脫水:80%,2 分鐘 95%,2 分鐘 100%,2 次,5 分鐘。
 
    18.二甲苯透明:I ,II (二甲苯)各 5 分鐘。
 
    19.封片:加拿大樹膠(或中性樹膠)封片。
 

聯(lián)


亚洲色成人网站www永久四虎| 亚洲日韩一区精品射精| 人妻被黑人粗大的猛烈进出 | 人妻 日韩 欧美 综合 制服| 大又大又粗又硬又爽少妇毛片| 无线乱码一二三区免费看| 欧美激情一区二区三区| 亚洲日本va午夜蜜芽在线电影| 久久精品麻豆日日躁夜夜躁| 亚洲爆乳无码专区www| 久久无码人妻一区二区三区午夜| 97久久婷婷五月综合色d啪蜜芽| 亚洲国产精品久久艾草| 又硬又粗又大一区二区三区视频 | 国语少妇高潮对白在线| 亚洲av无码之日韩精品| 国产白嫩护士被弄高潮| 婷婷五月综合缴情在线视频| 女人被狂躁c到高潮视频| 亚洲av日韩av女同同性| 亚洲国产一区二区a毛片| 亚洲精品国产福利一二区| 日韩 无码 偷拍 中文字幕| 久久天天躁狠狠躁夜夜爽| 无码熟妇人妻av在线网站| 国产精品毛片va一区二区三区| 欧美丰满熟妇xxxx性ppx人交| 国产在线精品一区二区三区直播| 999国内精品永久免费视频| 高潮潮喷奶水飞溅视频无码| 高潮迭起av乳颜射后入| 无套内射在线无码播放| 欧美日韩综合一区二区三区| 丰满岳妇乱一区二区三区| 激情人妻另类人妻伦| 丰满多毛的大隂户视频| 日日噜狠狠噜天天噜av| 中文字幕av一区二区三区人妻少妇| 无码孕妇孕交在线观看| 国产午夜福利在线播放| 日韩视频中文字幕精品偷拍|