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試劑空白有哪些不良影響嗎

更新時(shí)間:2021-01-19   點(diǎn)擊次數(shù):2961次

     試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類(lèi)物質(zhì)被氧化為醌而變?yōu)榧t色。堿性磷酸酶、r一谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、淀粉酶等檢測(cè)試劑會(huì)因基質(zhì)分解出硝基酚或酚基苯胺而變黃。有些試劑久置后變渾濁。這些情況均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等負(fù)反應(yīng),在放置過(guò)程中其試劑空白吸光度會(huì)因NADH自行氧化為NAD+而下降。原則上,吸光度上升的反應(yīng),其試劑空白吸光度越低越好,不能超過(guò)一個(gè)高限;相反,吸光度下降的反應(yīng),其試劑空白吸光度不能低于一個(gè)低限。因此,試劑空白吸光度限值,常作為程序參數(shù)輸入儀器,如經(jīng)核查超限,儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,提示更換試劑。需要指出的是,還原型輔酶I(或II)等投料量不足或劣質(zhì)的原料,往往需要加大用量,才使“表觀”吸光度上升,湊合過(guò)試劑空白核對(duì)的“關(guān)”,其后果為如下情況:

 
   1.線性范圍變窄 現(xiàn)象:高值測(cè)不高。原因:生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。
 
   2.靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度不足。
 
   3.低值偏高 現(xiàn)象:試劑空白的變化曲線(吸光度VS時(shí)間)明顯波動(dòng)。原因:試劑自身不穩(wěn)定,自行分解;工具酶純度不夠,雜酶含量超限,導(dǎo)致干擾作用。
 

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