血清是我公司的主營產(chǎn)品之一,主要用于細胞培養(yǎng)實驗,產(chǎn)品分類有GIBCO人血清、HYCIONE血清、PAA血清等等。今天,上海恒遠為大家解析進口血清使用操作中出現(xiàn)的常見問題,供您實驗參考。
一、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長期保存嗎?
答:一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。
二、如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
答:培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊瑂hou選MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。
三、何時須更換培養(yǎng)基?
答:視細胞生長密度而定, 或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。
四、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
答:不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
五、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
答:不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生很大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
六、為何培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,顏色會偏暗紅色,且pH值會越來越偏堿性?
培養(yǎng)基保存于4℃冰箱中,培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出,造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果,將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時,可以通入無菌過濾之CO2,以調(diào)整pH值。
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