一、血清的保存問題。
1、問:2006年6月到期的GIBCO胎牛血清到2007年5月還能用嗎?
答:只有試試了,如果一直在-20℃凍著來者,應(yīng)該還可以,先少用點看看。養(yǎng)細(xì)胞系應(yīng)該沒問題,原代不行。
2、問:請問我自然溶化好的胎牛血清和1640培養(yǎng)基今天用不上,明天用,我不想放到冰箱里,放在室溫下一晚行嗎?100毫升培養(yǎng)瓶加多少培養(yǎng)基呢?
答:可以放4℃。4-5ml。
3、問:4℃冰箱內(nèi)保存3個月的胎牛血清,能否繼續(xù)使用?相關(guān)細(xì)胞和其它試劑的代價比較高,不敢輕易嘗試。
答:需要長期保存的胎牛血清必須要保存在-20至-70℃的低溫冰箱中,4℃冰箱中保存時間不要超過1個月。
二、血清滅活時溫度問題。
1、問:因為實驗室水浴鍋失控,血清滅活時,溫度到了61.7℃,這血清還能用嗎?
答:多長時間啊?短時間應(yīng)該可以吧,我有一次加熱了一個多小時,還照樣用。
2、問:我滅活胎牛血清時,用的電磁爐,定在了70℃,本來說調(diào)溫度到56℃再放血清的,后來忘了,就把血清放進去了,所以滅活的溫度肯定超過56℃了,不知道這樣對血清有沒有影響?
答:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時間則從15分鐘到60分鐘不等,其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘??纯茨沭B(yǎng)的細(xì)胞是什么,一般的話估計問題不大,要是很珍貴的細(xì)胞還是慎重一點啊。熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì), 在對補體滅活以外,熱處理同時也對血清中可能存在的支原體具有滅活作用。現(xiàn)在好像不主張熱滅活,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負(fù)面影響,對血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生,此外,有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細(xì)胞的促粘附作用。