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如何用 Origin 計算 ELISA 實驗結(jié)果?

更新時間:2021-05-18   點擊次數(shù):2411次

  ELISA實驗終于做完了,結(jié)果被計算難倒了,作為科研人絕不認輸,那恒遠小編就給大家分享下,如何用 Origin 計算 ELISA 實驗結(jié)果。作為 ELISA 實驗的后步,檢測結(jié)果的計算對整個實驗十分重要,不小心就半途而廢了......

 

以夾心法為例:

1.ELISA 的樣本通常要設(shè)置 1~2 個復(fù)孔進行檢測,分別求出標準品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應(yīng)超出平均值的 20%;

2. 樣本的 OD(吸光度)平均值要減去標準品濃度為 0 時的 OD 平均值;

3. 建立標準曲線。

在對數(shù)坐標圖上擬合四參數(shù)的邏輯函數(shù)曲線(X 軸上為標準品濃度,Y 軸為對應(yīng)的OD值)。推薦使用 origin 軟件。詳細步驟如下:

 

第Ⅰ步:輸入 OD 值和標準品濃度

 第Ⅱ步:選擇擬合曲線類型

選中輸入的數(shù)值框,按如下操作依次點擊選項。

 

第Ⅲ步:勾選「find specific X/Y」

完成上述操作后,點擊 Fit 按鍵,擬合曲線和相關(guān)信息將自動(如第四步所示)

 

第Ⅳ步:查看標準曲線信息(如參數(shù)值,R-Square 等)

 第Ⅴ步:設(shè)置坐標軸類型為對數(shù)

雙擊第四步中的擬合曲線圖,對其進行編輯。雙擊 X 軸、Y 軸設(shè)置坐標類型為「Log10」。

 

 第Ⅵ步:根據(jù)標準曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列輸入樣本的 OD 值,對應(yīng)的濃度將在右列自動。

 
如果樣本的 OD 值超出標準曲線的上限,請在實驗適當(dāng)稀釋樣本以獲得精確結(jié)果。在分析數(shù)據(jù)時,樣本實際濃度應(yīng)為標準曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數(shù)。
 

 

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