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如何用 Origin 計(jì)算 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)果?

更新時(shí)間:2021-05-18   點(diǎn)擊次數(shù):2009次

  ELISA實(shí)驗(yàn)終于做完了,結(jié)果被計(jì)算難倒了,作為科研人絕不認(rèn)輸,那恒遠(yuǎn)小編就給大家分享下,如何用 Origin 計(jì)算 ELISA 實(shí)驗(yàn)結(jié)果。作為 ELISA 實(shí)驗(yàn)的后步,檢測(cè)結(jié)果的計(jì)算對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)十分重要,不小心就半途而廢了......

 

以?shī)A心法為例:

1.ELISA 的樣本通常要設(shè)置 1~2 個(gè)復(fù)孔進(jìn)行檢測(cè),分別求出標(biāo)準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)組樣本的吸光度的平均值。單個(gè)樣本的檢測(cè)值不應(yīng)超出平均值的 20%;

2. 樣本的 OD(吸光度)平均值要減去標(biāo)準(zhǔn)品濃度為 0 時(shí)的 OD 平均值;

3. 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

在對(duì)數(shù)坐標(biāo)圖上擬合四參數(shù)的邏輯函數(shù)曲線(xiàn)(X 軸上為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,Y 軸為對(duì)應(yīng)的OD值)。推薦使用 origin 軟件。詳細(xì)步驟如下:

 

第Ⅰ步:輸入 OD 值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度

 第Ⅱ步:選擇擬合曲線(xiàn)類(lèi)型

選中輸入的數(shù)值框,按如下操作依次點(diǎn)擊選項(xiàng)。

 

第Ⅲ步:勾選「find specific X/Y」

完成上述操作后,點(diǎn)擊 Fit 按鍵,擬合曲線(xiàn)和相關(guān)信息將自動(dòng)(如第四步所示)

 

第Ⅳ步:查看標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)信息(如參數(shù)值,R-Square 等)

 第Ⅴ步:設(shè)置坐標(biāo)軸類(lèi)型為對(duì)數(shù)

雙擊第四步中的擬合曲線(xiàn)圖,對(duì)其進(jìn)行編輯。雙擊 X 軸、Y 軸設(shè)置坐標(biāo)類(lèi)型為「Log10」。

 

 第Ⅵ步:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本濃度

選擇第四個(gè)工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列輸入樣本的 OD 值,對(duì)應(yīng)的濃度將在右列自動(dòng)。

 
如果樣本的 OD 值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的上限,請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)適當(dāng)稀釋樣本以獲得精確結(jié)果。在分析數(shù)據(jù)時(shí),樣本實(shí)際濃度應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上獲得的濃度乘以稀釋倍數(shù)。
 

 

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