久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 做山羊環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)?實驗的注意事項

做山羊環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)?實驗的注意事項

更新時間:2022-08-03   點擊次數(shù):1316次

注意:使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致。

需要但未提供的材料及耗材

  1、酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)

2、精密移液器、吸頭、加樣槽

3、蒸餾水或去離子水

4、洗瓶或者自動洗板機

5、37℃水浴鍋或恒溫箱

6、EP管

7、無粉一次性乳膠手套

 

【儲存條件及有效期】

  1、2-8保存,切勿冷凍,有效期6個月。

  2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8冰箱。

注意試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實驗后1 個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。

 

【適用儀器】

  半自動的酶標儀,如Thermo MK3,或者國產(chǎn)酶標儀。

 

【樣本要求】

1.樣本類型和采集

血清將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置0.5-2小時或4過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20-80保存,但應避免反復凍融。
    血漿EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20-80保存,但應避免反復凍融。

組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mLPBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

細胞裂解液: 吸棄培養(yǎng)液,用PBS(0.01 M,pH 7.4)將細胞洗一遍。用細胞刮刮下細胞(不能用胰酶和EDTA 處理),加入2-5 mL PBS(0.01 M,pH 7.4)。懸浮細胞可省略。收集細胞懸液,4℃ 1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預冷的PBS潤洗3次。加入適量的預冷PBS或非變性細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞,通常6孔板一個孔的細胞量需要150-250μL PBS重懸。 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融3次,使細胞充分裂解,也可將樣品進行超聲破碎,以達到裂解的目的。4℃ 10000×g 離心10min,除去細胞碎片,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2.樣本保存和穩(wěn)定性

樣本在2-8條件下,可以儲存72h,在- 20℃-80℃可以儲存6個月及以上。樣本收集后,不是一次檢測完,請按一次用量分裝凍存,避免反復凍融。

【注意事項】

1. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

 

2. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

 

3. 為免交叉污染,要避免重復使用手中的吸頭和試管。

 

4. 要嚴格避免操作過程中酶標板干燥。干燥會使酶標板上生物成份迅速失活。  

 

5. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

 

6. 顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,最佳顯色時間會有所不同。

 

7. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

 

8. 本試劑不同批號組分不得混用。

 

9. 揭封板膜和覆蓋封板膜時應避免用力過大導致液體濺出。

 

【結果計算】

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

聯(lián)


色悠久久久久综合欧美99| 久久久久无码专区亚洲av| 日日碰狠狠添天天爽无码| 久久久亚洲av成人网站| 蜜臀aⅴ国产精品久久久国产老师| 欧美freesex黑人又粗又大| 女人高潮内射99精品| 欧美老熟妇喷水| 亚洲av无码一区二区三区网站| 丁香婷婷激情综合俺也去| 国产一区二区精品久久| 九九视频在线观看视频6| 欧洲-级毛片内射| 少妇伦子伦精品无码styles| 日韩欧精品无码视频无删节| 久久久噜噜噜久久| 亚洲熟妇av一区二区三区漫画 | 一本一道波多野结衣av中文| 国产夫妇肉麻对白| 波多野结衣av手机在线观看 | 国产香蕉尹人在线观看视频| 日韩成人极品在线内射3p蜜臀| 国产l精品国产亚洲区久久| 国产精品视频一区二区噜噜| 国产精品毛片大码女人| 久久综合伊人77777麻豆| 狠狠色丁香婷婷综合潮喷| 亚洲成人小说| 亚洲av无码一区二区三区观看| 久久久久国色av免费观看性色| 无码毛片aaa在线| 无码av波多野结衣久久 | 精品国产一区二区三区av 性色| 国产在沙发上午睡被强| 成人国产欧美大片一区| 国产精品无码专区在线观看| 人妻丰满熟妇aⅴ无码| 国产av电影区二区三区曰曰骚网| 韩国三级中文字幕hd| 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇免费| 扒开双腿疯狂进出爽爽爽视频|