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ELISA試劑盒變質(zhì)原因詳解

更新時(shí)間:2023-04-10   點(diǎn)擊次數(shù):712次


ELISA試劑盒為什么會(huì)變質(zhì)?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢?

 

一、辦法學(xué)的影響   

ELISA測定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競爭等要素的影響,成果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難操控。

 

二、試劑要素

不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量wan 全一致,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測成果也存在差異,因而必須挑選和訂購長批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號(hào)改動(dòng)而從頭建立質(zhì)控體系及從頭評(píng)估試劑的雜亂進(jìn)程,并且能夠保證成果的穩(wěn)定性;關(guān)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止重復(fù)凍融造成試劑的失效。

 

三、樣本要素

標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素,前者包含類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、本身抗體、溶菌酶等,后者包含標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等。

 

四、操作要素

ELISA操作步驟雜亂,操作不當(dāng)將引起較大的差錯(cuò)。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。

 

五、灰區(qū)的設(shè)置

通常情況下,ELISA定性試驗(yàn)以“陽性"和“陰性"來報(bào)告成果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定成果報(bào)告的根據(jù)。

 

六、標(biāo)本復(fù)查

ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂,影響要素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也或許因孔間差異而造成成果的差異,因而加大復(fù)查力度是保證成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項(xiàng)目的可疑、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。

 

七、常表明成果的常用辦法

 a.定性測定

 b.半定量測定 成果一般以滴度表明。

 c.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,制作規(guī)范曲線,成果以肯定量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。 

 

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