久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 犬黑熱病(L.donovani)ELISA試劑盒使用說明書

犬黑熱病(L.donovani)ELISA試劑盒使用說明書

更新時間:2023-07-11   點擊次數(shù):516次

黑熱病(L.donovani)ELISA試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

                                                                   96T

 

使用目的:

本試劑盒用于測定犬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中黑熱病(L.donovani)表達。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本犬黑熱病(L.donovani)表達。用純化的犬黑熱病(L.donovani)抗體包被微孔板,制成固相抗,可與樣品中黑熱病(L.donovani)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的黑熱病(L.donovani)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中犬黑熱病(L.donovani)的存在與否。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止液

6ml×1

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1

8

陽性對照

0.5ml×1

3

標(biāo)包被

12孔×8

9

陰性對照

0.5ml×1

4

樣品稀釋液

6ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

6ml×1

11

封板膜

2 

6

顯色劑B

6ml×1/

12

密封袋

1

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

 

計算和結(jié)果判定:

  試驗有效性:陽性對照孔平均值1.00; 陰性對照平均值0.20

  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定:樣品OD< 臨界值(CUT OFF)者為黑熱病(L.donovani)陰性

  陽性判定:樣品OD 臨界值(CUT OFF)者為黑熱病(L.donovani)陽性。

注意事項

1.操作嚴(yán)格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時,參考波長為630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

保存條件及有效期

1試劑盒保存:;2-8

2.有效期:6個月

 


聯(lián)


久久久一本精品99久久精品66| a人片在线观看苍苍影院| 男女性爽大片视频| 色欲av蜜桃一区二区三| 国产对白国语对白| 中文亚洲欧美日韩无线码| 麻豆av一区二区三区久久| 黑鬼大战白妞高潮喷白浆| 色婷婷综合久久久久中文一区二区| 亚洲v无码一区二区三区四区观看| 国产精品久久久久aaaa| 97精品久久久久中文字幕| 永久免费精品精品永久-夜色| 色欧美片视频在线观看| 久久97久久97精品免视看秋霞| 亚洲成a人片在线观看无码| 小13箩利洗澡无码免费视频 | 伊人久久大香线蕉亚洲| 国产精品人人做人人爽| 亚洲国产精品va在线播放| 人妻少妇精品中文字幕av蜜桃| 国产亚州精品女人久久久久久| 亚洲精品国产成人| 少妇私密会所按摩到高潮呻吟| 久久亚洲精品中文字幕| 好男人www免费高清视频在线观看| 国产激情一区二区三区| 国产二级一片内射视频播放| 久久精品国产99久久久古代| 欧美激情肉欲高潮视频| 少妇性l交大片7724com| 狠狠色噜噜狠狠狠狠97首创麻豆| 曰韩无码av一区二区免费| 免费少妇a级毛片| 法国白嫩大屁股xxxx| 中国老熟女重囗味hdxx| 日韩av无码精品人妻系列| 扒开双腿猛进入喷水高潮叫声| 51精品国产人成在线观看| 吃奶摸下激烈床震视频试看| 成人区人妻精品一区二区不卡视频 |