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幽門螺旋桿菌抗原快速檢測條使用說明書

更新時間:2012-03-23   點擊次數(shù):2016次

 

幽門螺旋桿菌抗原快速檢測條使用說明書
                            一步檢測幽門螺旋桿菌
使用說明
CerTest的幽門螺旋桿菌抗原快速檢測條利用免疫層析法一步定性檢測大便樣本中的幽門螺旋桿菌。
簡介
幽門螺旋桿菌(.H.P)是發(fā)現(xiàn)于胃粘液層或依附于胃上皮層的一個螺旋形的典型鞭毛,革蘭氏陰性細菌,感染胃粘膜。它引發(fā)了超過90%的十二指腸潰瘍和將近80%的胃潰瘍。
隨著該細菌存在與腸胃(胃和十二指腸)疾?。ㄈ缥秆?、胃潰瘍和胃癌)確診之間強相關性的確定,HP抗原檢測的重要性日益彰顯
測試原理
.H.P抗原快速檢測條應用免疫層析法定性檢測大便樣本中的幽門螺旋桿菌。檢測帶區(qū)域的反應膜預包被多克隆抗體,以結合.H.P抗原。
在檢測過程中,樣本可以與事先預染在檢測條中的有色結合物(抗H.P多克隆抗體-紅色聚苯乙烯微球)反應得到結合物。然后結合物通過毛細管作用在膜上繼續(xù)向前移動。當樣本流經檢測膜時,有色微粒移動。當存在陽性結果的時候,膜上的特異性抗體將捕獲有色結合物。該結合物繼續(xù)向前移動至質控帶固定的抗體位置,一條綠色的條帶。綠色條帶的出現(xiàn)有兩個意義:1)確認加入了足夠量的樣本;2)確認流向正確;3)作為試劑的內部質控。
儲存和穩(wěn)定性
于2-30ºC下密封保存,檢測條可穩(wěn)定至每個包裝上的的保質期。檢測條直到使用時才拆開密封包裝。請勿冰凍。
注意事項
1.         僅供專業(yè)人士體外診斷
2.         請勿使用過期產品
3.         所有的樣本需考慮到潛在的有害性并按照污染物處理方式處理
4.         檢測后應將廢棄的檢測卡丟棄在適當?shù)纳镂:θ萜髦小?/div>
標本采集和準備
糞便標本應儲存在干凈容器中,取樣后立即檢測。樣品冷藏(2-4℃)可保存1-2天,-20℃冷凍zui長可儲存1年。如冷凍,應*解凍并恢復至室溫后方可進行檢測。
樣品制備(見下圖)
(1)擰開蓋,用小棍棒挑取一點標本,如果糞便標本是液狀,則用吸樣槍吸取100ul,將取出的樣品放入試管內。
(2)將糞便標本與稀釋液混合,搖晃試管使樣品充分分散。
 
 
提供材料
l         檢測條
l         樣本稀釋液
l         說明書
l         糞便收集管
需自備材料
l         樣品收集容器
l         檢測管或瓶
l         一次性手套
l         計時器
操作程序
檢測前先將質控品和糞便標本恢復至室溫(15-30)。在未準備好檢測前請勿撕開包裝。拆開之前僅將所需要數(shù)量的檢測卡/條恢復至室溫。有以下兩種方式進行試驗的操作:
A)以卡的方式進行檢測:
1.       使用前撕開檢測卡的包裝。
2.       繼續(xù)搖晃試管是糞便*散開。折斷試管頂端(3)。
3.       水平放置每個樣品及質控品均單獨收集,準確滴加5滴或150ul樣品在檢測條的白色端(4)。每個樣本或質控品分別使用大便收集管和裝置。
4.       10分鐘之內讀取結果。
B)條的檢測方式
1.     使用前撕開檢測卡的包裝。
2.     繼續(xù)搖晃試管是糞便*散開。折斷試管頂端(3)。
3.     10滴樣本稀釋液于檢測管或檢測瓶中(5)。將H.P抗原檢測條白色的一端向下垂直浸入樣本中,注意不要超出沉浸線標記。
4.     10分鐘之內讀取結果。

A)以卡的方式進行檢測
B)條的檢測方式
5
10
 

 
 
 
 
 
 
 
 


 

結果判讀請參見以下插圖

陽性          陰性           無效
 

 
 
 
 
 
 


 

陰性:只在白色的中心區(qū)域(質控區(qū)域)顯示一條綠色線(質控線)的為陰性。
陽性:質控區(qū)域出現(xiàn)一條綠色線,白色的中心區(qū)域(檢測區(qū)域)出現(xiàn)一條紅色線(結果線)。
無效結果:質控區(qū)域沒有出現(xiàn)綠色線,檢測區(qū)域不管有無線顯示都為無效結果。不夠量的樣本、不正確的操作程序、或變質的試劑zui有可能導致無效的結果。如果這個問題繼續(xù),終止使用該試劑盒并您當?shù)氐慕涗N商。
 
結果解讀注意事項
結果線區(qū)域內(T)的紅色帶的深淺表示樣本抗原的濃度。但是這種定性檢測不能決定抗原的定量值或增加的比率。
質量控制
本檢測卡中包含有內部控制。在質控區(qū)域(C)顯示的綠色帶是一條內部控制線。它可確認標本量的是否足夠或操作程序是否正確。
局限性
1. 檢測必須在密封袋開封后兩小時內完成。
2. 糞便過量可導致結果錯誤(看起來為棕褐色)。須用稀釋液稀釋樣本并重復檢測。
3. 某些稀薄的或腹瀉的樣本可能降低顯色的強度。
4. 本檢測只作為幽門螺旋桿菌感染的初步診斷,臨床醫(yī)生在此基礎上進行進一步的臨床觀察和實驗室綜合評估后做出確診。
 
性能參數(shù)
靈敏度和特異性
對出現(xiàn)H.P感染癥狀的患者進行檢測。通過與市面有售的ELISA方法的H.P檢測產品進行對比,對CerTest的H.P抗原檢測條進行評價。
靈敏度                    特異性
94%;                   >99%。
產品中使用的鼠單克隆抗體保證了該檢測的高特異性。該抗體過去常常用于H.P檢測,能識別在患者大便樣本和體外細菌培養(yǎng)中的抗原上的抗原決定部位,提來自不同商業(yè)樣本的降解幽門螺旋桿菌提取物能與H.P檢測條反應。
參考文獻
1- Bruce E. Dunn, Hartley Cohen & Martin J. Blaser. Helicobacter pylori. Clin. Microbiol. Rev.
10 (4), 720-741, Oct. (1997)
2- Martin J. Blaser. Helicobacter pylori and gastric diseases. BMJ; 316: 1507-1510 (1998).
3- John L. ford, Antonello Covacci, Rino Rappuoli & Paolo Ghiara. Immunobiology of
Helicobacter pylori infections. Current Opinion in Immunology, 9; 498-503 (1997).
 
 
 

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