久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術文章 > 酶聯(lián)免疫斑點檢測技術特點

酶聯(lián)免疫斑點檢測技術特點

更新時間:2013-03-18   點擊次數(shù):1701次

ELISPOT全名為酶聯(lián)免疫斑點檢測,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它結合了細胞培養(yǎng)技術與酶聯(lián)免疫吸附技術(即ELISA技術),能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。其技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養(yǎng)中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯(lián)斑點顯色的方式將其表現(xiàn)出來(Sedgwick JD 2005)。

該技術檢測細胞因子具有三大優(yōu)點:其一,靈敏度高。在一百萬個陰性細胞中只要有一個分泌細胞因子的陽性細胞即可被檢測出來。這是目前為止,zui為靈敏的檢測技術,靈敏度比傳統(tǒng)的的ELISA方法高2-3個數(shù)量級。其二,單細胞水平,活細胞功能檢測。ELISPOT檢測的是單個細胞分泌,而非細胞群體的平均分泌。在檢測的過程中,有活細胞培養(yǎng)與抗原刺激階段,檢測的是活細胞的功能,而非死細胞的物。其三,操作簡便經(jīng)濟,可以進行高筒量篩選。ELISPOT沒有復雜的細胞體外擴增過程,不使用同位素,不需要大型的、專門的實驗儀器設備。按照標準化的實驗操作,一個實驗者可以同時處理數(shù)百個樣品,效率遠遠高于其它檢測方法(Kalyuzhny AE 2005)。

實驗設計在96孔培養(yǎng)板上進行,直接以培養(yǎng)板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纖維素膜為基質,包被上特異性的單克隆抗體,用以捕獲細胞分泌的細胞因子。(由于涉及到細胞培養(yǎng)的過程,對單克隆抗體的要求要遠高于ELISA中的捕獲抗體,該抗體需要無毒,不含內毒素,親和力高等特點。)之后,在培養(yǎng)板的孔內加入細胞培養(yǎng)基(現(xiàn)在無血清ELISPOT技術已經(jīng)成熟,培養(yǎng)基中可以不再含有血清)、待檢測的細胞以及抗原刺激物進行培養(yǎng)。

在特異性的抗原或者非特異性的有絲分裂原的刺激下,數(shù)小時之內,T細胞就會開始分泌各種細胞因子。細胞因子當即就被位于細胞下方的膜上的單克隆抗體所捕獲。在洗去細胞之后,被捕獲的細胞因子可以與生物素標記的第二抗體結合,然后用酶標親和素再與生物素結合,進行化學酶聯(lián)顯色,就可以在膜的局部形成一個個圓形的斑點。每一個斑點就對應了當初一個分泌細胞因子的細胞,這些細胞被稱為斑點形成細胞(Spots forming cells SFCs)。統(tǒng)計膜上的斑點的數(shù)目,再除以當初加入孔內的細胞總數(shù),就可以計算出陽性細胞的頻率。

上海恒遠生物有限公司大量供應ELISA試劑盒,酶聯(lián)免疫試劑盒,動物elisa試劑盒,抗體(兔單抗、鼠單抗、分裝抗體、免疫組化抗體、二抗、標簽抗體),細胞(ATCC原代細胞、培養(yǎng)基、正常細胞、腫瘤細胞),生化試劑(氨基酸、緩沖劑、分離試劑、培養(yǎng)基、蛋白質、酶、生化酶及輔酶、核酸及其衍生物、碳水化和物、抗生素、染色劑、維生素試劑),Amresco試劑等多家進口產品,歡迎各位新老客戶惠顧!

聯(lián)


久久九九久精品国产免费直播| 亚洲精品成人区在线观看| 欧美大屁股xxxx高跟欧美黑人 | 久久久久久久97| 久久久久亚洲av无码专区| 真人做受试看120分钟小视频| 男人用嘴添女人下身免费视频| 肉体裸交137日本大胆摄影| 国产精品亚洲一区二区三区 | а√中文在线资源库| 99久久精品免费看国产一区二区三区 | 无码人妻丰满熟妇啪啪| 免费观看18禁无遮挡真人网站| 中文字幕av免费专区| 欧美freesex黑人又粗又大| 久久精品国产一区二区电影 | 欧美无砖专区一中文字| 亚洲综合色丁香婷婷六月图片| 农村老熟妇乱子伦视频| 日韩欧美在线综合网| 久久亚洲av永久无码精品| 牲欲强的熟妇农村老妇女视频| 色老板精品视频在线观看| 国产午夜精品一区二区三区| 亚洲国产一区二区a毛片| 欧洲vat一区二区三区| 一本加勒比hezyo无码资源网 | 国产婷婷色一区二区三区| 精品国产18久久久久久| 国产成人艳妇aa视频在线| 久久久久无码精品国产| 亚洲av中文无码乱人伦在线播放 | 午夜福利啪啪片| 人妻无码αv中文字幕久久琪琪布| 亚洲精品动漫免费二区| 亚洲精品无码不卡在线播放| 人妻丝袜中文无码av影音先锋专区| 国产av一区二区三区传媒| 无码精品a∨在线观看十八禁| 国产最新进精品视频| 国产精品久久久久久久久久免费|