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免疫血清的正確途徑與方法

更新時(shí)間:2013-07-05   點(diǎn)擊次數(shù):1899次

免疫血清的正確途徑與方法

免疫途徑應(yīng)是多種多樣的,如靜脈、腹腔、肌肉、皮內(nèi)、皮下和淋巴結(jié)等,但肌肉和皮內(nèi)兩種途徑較少應(yīng)用。目前一般傾向于小劑量、多點(diǎn)、多途徑的方法,但具體應(yīng)視抗原的生物學(xué)特性和理化特性來決定。酶、毒素等生物活性抗原,一般不宜采用靜脈注射。球蛋白抗原免疫可選用皮下、皮內(nèi)和肌肉注射。但效價(jià)不高,因此大都選用抗原加弗氏佐劑、足掌皮下注射的方法,或者注卡介苗使腘淋巴結(jié)腫脹,然后直接注入腘淋巴結(jié)內(nèi)的方法,增強(qiáng)抗體的產(chǎn)生。
足掌注射為近年來常用的免疫途徑,能獲得相當(dāng)良好的效果,但劑量不宜過大,一般家兔0.2~0.5mL,否則腫脹嚴(yán)重。有的采用先經(jīng)足掌內(nèi)注射卡介苗(后足掌各注 0.2~0.5mL)。10~14d后,腘淋巴結(jié)腫大,然后向淋巴結(jié)內(nèi)注射加有*佐劑的抗原,兩側(cè)各0.5mL左右,半個(gè)月后再注射不加佐劑的抗原(3mg/mL)皮下或肌肉多點(diǎn)注射,每點(diǎn)0.1mL,總量0.5mL左右、這樣免疫效果較為理想。
注射次數(shù)可分為一次注射和多次注射兩種。一次注射,抗體產(chǎn)生的慢,效價(jià)低,但特異性高,如果再次注射,抗體產(chǎn)生的快,效價(jià)高,持續(xù)時(shí)間也較久。多次注射,可得價(jià)血清,但往往特異性較差.多次免疫的間隔時(shí)間,可因抗原性質(zhì)不同而異。
免疫血清動(dòng)物的選擇
實(shí)驗(yàn)室常用的動(dòng)物是家兔和羊,有時(shí)也用豚鼠或雞,大量制備商品性抗血清時(shí),可采用馬、牛等大動(dòng)物。對動(dòng)物的基本要求是:
1、與抗原物質(zhì)的種屬關(guān)系越遠(yuǎn)越好;
2、發(fā)育成熟、健壯、體重合乎規(guī)定,如家兔要求體重在2~3Kg以上;
3、為成年雄性動(dòng)物,如用雌性動(dòng)物,則不得用懷孕者。
二、概 念
抗體是在抗原物質(zhì)刺激下,人或脊椎動(dòng)物免疫系統(tǒng)的漿細(xì)胞產(chǎn)生的,能與抗原發(fā)生特異性反應(yīng)的免疫球蛋白,主要存在于人和動(dòng)物的血清及其體液中
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兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒

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