久久久久久av无码免费网站下载,一本加勒比hezyo无码资源网,久久久久黑人强伦姧人妻,好爽毛片一区二区三区四

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 細(xì)胞培養(yǎng)的過程詳解(轉(zhuǎn)載)

細(xì)胞培養(yǎng)的過程詳解(轉(zhuǎn)載)

更新時間:2013-09-09   點擊次數(shù):1126次

一、準(zhǔn)備工作

    準(zhǔn)備工作對開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進行.準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試,具體內(nèi)容可參閱有關(guān)文獻.

二、取材

    在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細(xì)胞(視實驗?zāi)康亩ǎ?經(jīng)過一定的處理(如消化分散細(xì)胞、分離等)后接入培養(yǎng)皿中,這一過程稱為取材.如是細(xì)胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程.機體取出的組織細(xì)胞的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng).

    理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實際上幼體組織(尤其是胚胎組織)比成年個體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng),腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng).取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時,可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養(yǎng)液中保存.取組織時應(yīng)嚴(yán)格保持無菌,同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì).取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理.

   由組織并分離分散細(xì)胞的方法可參閱有關(guān)文獻.

三、培養(yǎng)

    將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng).如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基.如系細(xì)胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進行細(xì)胞計數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基.細(xì)胞進入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞盡早進入生長狀態(tài).

    正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時檢查.

    一般原代培養(yǎng)進入培養(yǎng)后有一段潛伏期(數(shù)小時到數(shù)十天不等),在潛伏期細(xì)胞一般不分裂,但可貼壁和游走.過了潛伏期后細(xì)胞進入旺盛的分裂生長期.細(xì)胞長滿瓶底后要進行傳代培養(yǎng),將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng).每傳代一次稱為“一代”.二倍體細(xì)胞一般只能傳幾十代,而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可無限地傳代下去.轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能具有惡性性質(zhì),也可能僅有不死性(Immortality)而無惡性.

   培養(yǎng)正在生長中的細(xì)胞是進行各種生物醫(yī)學(xué)實驗的良好材料.

四、凍存及復(fù)蘇

    為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存.凍存的溫度一般用液氮的溫度-196℃,將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護劑(一般為二甲亞砜或甘油)的培養(yǎng)基,以一定的冷卻速度凍存,zui終保存于液氮中.在極低的溫度下,細(xì)胞保存的時間幾乎是無限的.

   復(fù)蘇一般采用快融方法,即從液氮中取出凍存管后,立即放入37℃水中,使之在一分鐘內(nèi)迅速融解.然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進行培養(yǎng).

   凍存過程中保護劑的選用、細(xì)胞密度、降溫速度及復(fù)蘇時溫度、融化速度等都對細(xì)胞活力有影響.

上海恒遠(yuǎn)生物供應(yīng)科研類ELISA試劑盒,是多家科研機構(gòu)和高校ELISA試劑盒供應(yīng)商,質(zhì)量保證,*,同時免費提供代測服務(wù).產(chǎn)品范圍包括:人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體實驗和科研ELISA檢測試劑盒。

 

聯(lián)


亚洲性爱视频| 无遮挡啪啪摇乳动态图gif| 亚洲av无码乱码在线观看性色 | 特黄特色三级在线观看| 国产午夜精品一区二区三区软件 | 亚洲av无码成h在线观看| 国产真实伦在线观看| 内射白浆一区二区在线观看| 亚洲人成电影在线播放| 疯狂做受xxxx高潮视频免费| 三年片免费观看大全有| 狠狠色噜噜狠狠狠狠色综合久av | 精品无码久久久久成人漫画| 精品国产欧美一区二区| 少妇下面好紧好多水真爽播放| 国产精品一区二区av| 老头天天吃我奶躁我的动图| 精品深夜av无码一区二区老年| 午夜成人理论无码电影在线播放| 全部免费毛片在线播放| 欧美孕妇变态孕交粗暴| 亚洲av无码第一区二区三区| 国产免费牲交视频| 欧美午夜精品久久久久免费视 | 欧美jizzhd精品欧美| а中文在线天堂| 国产超碰人人爽人人做| 国产精品538一区二区在线| 久久99精品久久久久久噜噜| 天天爽天天爽天天爽| 好男人好资源电影在线播放| 精品国产精品国产偷麻豆| 免费黄色电影在线观看 | 国产乱码精品一区二区三区中文| 久久毛片免费看一区二区三区| 免费av一区二区三区无码| 日本强好片久久久久久aaa| 精品人妻大屁股白浆无码| 国产末成年女av片| 久久精品无码一区二区无码 | 婷婷无套内射影院|