前言:時光匆匆而過,不久前我們常提到年末,今天便是本年度的zui后一日了。作為國內(nèi)ELISA試劑盒批發(fā)商,上海恒遠(yuǎn)帶您一起回顧2014年主要的*ELISA操作重點,希望在新一年的實驗中可以給您帶來幫助。
*、讓競爭ELISA方法起到*作用
ELISA試劑盒的英文名稱是ELISA KIT,它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。
可以利用競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗 氟喹諾酮抗原。檢測時,加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,氟喹諾酮抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的氟喹諾酮競爭性地與氟喹諾酮抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測,樣品中的氟喹諾酮濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
第二、冬季也要將ELISA實驗保溫做得棒棒噠
1. 為何要保溫?
因為ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。
2. 保溫的方式有哪些咧?
除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴:
① 可將ELISA試板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。
② 為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。
③ 若用保溫箱,應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。
④ 濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。
⑤ 無論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
⑥ 室溫溫育的反應(yīng),操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20~25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。
⑦ 室溫溫育時,只要平置于操作臺上即可。
⑧ 應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。
⑨ 為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
第三、實驗中的回溫平衡
在加樣之前約半小時左右,把試劑盒從冰箱中取出,放置在室溫下進(jìn)行平衡,平衡到用手握住試劑瓶感覺到不涼為止。如果時間匆忙的話也可以利用手握住試劑瓶進(jìn)行快速回溫。
以上就是今天的全部內(nèi)容了,在未來的時光里,我們期待可以與您共同完成ELISA實驗,歡迎關(guān)注上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒批發(fā)商,我們明年再見!