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ELISA實驗中加樣可能碰到的問題及解決方法

更新時間:2015-08-26   點擊次數(shù):1937次

在ELISA實驗中一般有3次加樣步驟,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。在加樣的過程中會碰到什么問題呢?讓我們一起看一下

實驗過程中加樣可能碰到的問題:
1、過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);
2、手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間;
3、加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。
相應(yīng)解決辦法:
1、標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2、加樣后及時放入孵箱。
3、加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4、如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5、標(biāo)本較多時,請分批操作。

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