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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中影響結(jié)果的因素及解決方法

更新時(shí)間:2016-06-13   點(diǎn)擊次數(shù):1383次

   ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研領(lǐng)域上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我司將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析:
1 選擇試劑
選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
ELISA試劑盒解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。

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