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酶聯(lián)免疫,免疫組化,原位雜交實驗代做

更新時間:2012-04-25   點擊次數(shù):1829次

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酶聯(lián)免疫吸附試驗 (以下簡稱ELISA) :是酶   免疫測定技術(shù)中應(yīng)用zui廣的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應(yīng)板 ) 表面,使酶標記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的 ELISA 法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。

免疫組化,是應(yīng)用免疫學基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(shù)(immunocytochemistry)。

原位雜交(in situ hybridization)

將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交!

 

  使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。

 

  RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內(nèi)RNA表達的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體 (Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù) 經(jīng)不斷改進,其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已 成為zui有效的分子病理學技術(shù),同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

 

  FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實驗室逐步進入臨床診斷領(lǐng)域?;驹硎菬晒鈽擞浀暮怂崽结樤谧冃院笈c已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。DNA熒光標記探針是其中zui常用的一類核酸探針。利用此探針可對組織、細胞或染色體中的DNA進行染色體及基因水平 的分析。熒光標記控針不對環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進行多色觀察分析,因而可同時使用多個探針,縮 短因單個探針分開使用導致的周期過程和技術(shù)障礙。

上海恒遠生物科技有限公司是一家專注于生命科學和生物技術(shù)領(lǐng)域的企業(yè)。從事生物技術(shù)領(lǐng)域相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā),銷售和技術(shù)服務(wù)。我們的主營業(yè)務(wù)為:ELISA試劑盒,化學試劑,標準品,抗體以及耗材。

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