酶標儀已經(jīng)逐漸成為了實驗室里的常規(guī)儀器,普通酶標儀的價格并不算高,不過若是沒選對合用的型號也相當令人頭疼。購買儀器往往比選試劑麻煩得多,各種各樣的參數(shù)難免讓人挑花了眼,怎樣才能找到適用的酶標儀呢? 酶標儀一般分為普通酶標儀和多功能酶標儀,普通酶標儀的功能基本相當于一個分光光度計,主要用于吸收光(OD值)檢測,我們一般用普通酶標儀進行蛋白/核酸定量、Elisa、MTT等常規(guī)實驗。而多功能酶標儀在此基礎(chǔ)上還可以進行發(fā)光檢測和熒光檢測,能夠直觀反映出目標分子在細胞內(nèi)的活性。多功能酶標儀應用相當廣泛,包括:報告基因研究、分子間相互作用、信號傳導、藥物代謝和藥物篩選等等。 濾光片vs光柵 在選購酶標儀的時候,我們會首先面臨一個選擇,濾光片還是光柵?酶標儀主要分為濾光片型和光柵型,分別以兩種不同方式特定波長的激發(fā)光,一種是通過濾光片,一種是通過單色器(包括光柵和棱鏡)。對于我們使用者來說,這兩種酶標儀究竟有何區(qū)別呢? 濾光片透光度高,光路簡單,能夠zui大程度減少光線的損失,因此濾光片型酶標儀一般要比光柵型酶標儀靈敏。此外,濾光片能夠?qū)崿F(xiàn)快速的波長轉(zhuǎn)換,很適合離子通道比率分析以及雙信號快速動力學分析等。濾光片的配置決定了酶標儀所能使用的波長,我們更改實驗波長就是在切換濾光片。濾光片型酶標儀一般要比光柵型便宜一些,如果我們需要的波長比較固定,對靈敏度又有較高要求,那么濾光片型酶標儀無疑是*選擇。若是日后想要應用其他波長,還需另外購買濾光片,要是需添置的波長多就不大合算了。所以在我們出手之前一定要先想好未來可能進行的各項研究,謀定而后動。 目前市面上的光柵型酶標儀其實比濾光片型更為普遍,這是因為光柵可以靈活設(shè)置波長,就算臨時開展新研究也不用專門去買濾光片。而且如果我們要用未知染料進行檢測,或是需要自定義波長和光譜掃描,就只能選光柵型酶標儀。此外,光柵在近紫外區(qū)的檢測效率也更高(如色氨酸熒光檢測)。zui先推出光柵型酶標儀的是MD公司(Molecular Devices),MD酶標儀采用一個光柵和一個濾片濾光的單光柵系統(tǒng)。后來又出現(xiàn)了兩個光柵組成的濾光系統(tǒng),例如PE、TECAN、Thermo、BioTek等公司的一些產(chǎn)品,這類系統(tǒng)由于激發(fā)和發(fā)射各用兩個光柵也被稱為四光柵系統(tǒng)。 總的來說,如果實驗室應用很多需要多種波長,那么選擇靈活方便的光柵型酶標儀準沒錯。若是應用比較單一但對靈敏度要求高,物美價廉的濾光片型酶標儀就相當貼心。此外,還有BioTek公司的Hybrid Technology系統(tǒng),該系統(tǒng)將濾光片和單色器組合起來,想用濾光片時選濾光片,想用光柵時選光柵,就是這么簡單。 適合的才是的 不論我們買什么,適合自己的才是的,選擇酶標儀時也是如此。酶標儀性能指標包括測定波長范圍、濾光片配置、檢測速度、吸光度范圍、線性范圍、分辨率、準確度、精密度等。 對于一般生命科學實驗室來說,酶標儀主要可用于基因表達、信號傳導、ELISA、蛋白和核酸定量、細胞活性分析和免疫分析。如果要進行細胞學實驗,酶標儀一般要能夠底部讀取、微孔板掃描、并支持孵育和搖晃。而要做高通量篩選的實驗室,就需要考慮到檢測速度和靈敏度。高通量篩選可能涉及到特殊篩選溶液、更低的檢測限以及大量微孔板。在選擇酶標儀時除了要關(guān)注可靠性、靈敏度和一致性以外,能否對微孔板所有孔進行同時檢測也是不可忽視的考量因素。 應用保障:認證 面對不同品牌型號眾多的酶標儀,要怎樣客觀評估它們的性能呢?一些機構(gòu)和大型企業(yè)為酶標儀檢測性能提供了第三方認證。這些認證主要表明酶標儀能否適用于一些高要求試劑盒,涵蓋了酶標儀的各項性能,包括檢測方法、靈敏度、線性范圍、孔間干擾等。 下表為列出了一些相關(guān)應用的認證,你可以根據(jù)自己的應用按圖索驥:
任何儀器在使用過程中總會遇到些問題,用得久了更會涉及到維修。因此,售后服務(wù)是購買酶標儀時不能不考慮到的問題。購買儀器時一般都會在合同中列明維修條款,不過若是供應商在本地設(shè)有辦事處,解決問題起來就更方便了。 日常保養(yǎng)很重要 酶標儀是一種精密的光學儀器,若是日常不注意保養(yǎng)而影響了儀器性能,很可能會在不知不覺中影響了實驗結(jié)果。其實,酶標儀的日常保養(yǎng)并不復雜,養(yǎng)成好習慣就可以避免大問題。酶標儀附近保持干燥,樣品濺出也需要及時清理,若潮濕導致電路進水就需要換配件,這樣就太不值當了。儀器表面可用不太潮濕且干凈無塵的布擦拭,蒸餾水、乙醇、0.5%次氯酸鈉都可以用來清潔,但其他有機溶劑可不能亂用。此外,電腦和主機之間的數(shù)據(jù)線,要等*關(guān)機之后才能拔掉,不然可能損壞通訊網(wǎng)絡(luò),這樣產(chǎn)生的維修費用可是很高的哦。 儀器使用小tips 不論儀器售后有多好,也很難做到工程師隨叫隨到,因為工程師們往往是公司中zui忙碌的人。要是酶標儀報錯無法使用,而我們的實驗又等不了怎么辦?據(jù)資深工程師介紹,其實他遇到的大多數(shù)維修問題都是很簡單的,用戶通過咨詢就可以自行解決。以下就是一些酶標儀報錯的常見情形,這些實用小tips一定可以幫你成為動手達人,一解實驗室的燃眉之急。 情景一:陽光明媚的中午,放在窗邊的酶標儀報錯,自檢也無法運行。別緊張,先給它另外騰一個陰涼地再試一下。酶標儀是一種精密的光學儀器,強光自然會有巨大影響,所以是不能放在窗邊的。 情景二:實驗室迎來繁忙的一天,落地式離心機忙個不停,旁邊的酶標儀又報錯,真頭疼。別擔心,儀器多半不是大毛病,只不過被大型離心機影響了。大功率設(shè)備產(chǎn)生的磁場會干擾其他電器,此外振蕩也會影響酶標儀微孔板中的液面高度,導致檢測結(jié)果不準確。趕緊挪地方吧,別再和離心機、搖床、混勻器或其他大功率設(shè)備摻和到一起了。 情形三:又是一年梅雨季,一陣子沒用酶標儀,怎么有些波長就用不了了?潮濕是酶標儀的大敵,不僅可能讓濾光片受潮,還會損害電路。這時把濾光片拆下來對著太陽一看,往往會看到一層霉,只要好好清理就能正常使用。在清理時我們一般是用擦鏡紙向一個方向擦拭,不過對付普通灰塵其實可以用洗耳球吹,多簡單。至于頑固污漬,可以用無水乙醇擦拭,然后自然晾干或40℃低溫烘干,高溫乃是大忌。 |
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