小鼠同我們?nèi)祟愐粯樱瑏碓吹目贵w也有5種同種型抗體,它們是:IgA、IgD、IgE、IgG、IgM。每種同種型抗體都擁有不同的重鏈。種型亦被稱為類,又因抗體亦被稱為免疫球蛋白,所以Ig的后綴字母代表抗體的類或亞類。
上海恒遠(yuǎn)為您細(xì)細(xì)解說:鼠抗也有類型之分?還有一定重要性?
利用特異的抗重鏈穩(wěn)定區(qū)抗體進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗或流式細(xì)胞實驗,并與適當(dāng)?shù)目贵w種型進(jìn)行對照,可以鑒定鼠抗的種型和亞類。眾多不同的商家提供了形式多樣的種型鑒定試劑盒。
分子量
一個免疫球蛋白分子有兩條重鏈和兩條輕鏈。重鏈和輕鏈之間通過鏈內(nèi)和鏈間的二硫鍵連接在一起。IgA,IgD,和IgG的重鏈都有一個由三個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域組成的穩(wěn)定區(qū)。例如,鼠IgA的重鏈穩(wěn)定區(qū)有344個氨基酸;鼠IgG1穩(wěn)定區(qū)有324個氨基酸。而其他種型的重鏈含有的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域數(shù)目則可能有所不同,例如,分泌性膜結(jié)合抗體IgM重鏈穩(wěn)定區(qū)包含兩個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。
IgE和IgM的重鏈穩(wěn)定區(qū)均由四個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域組成。鼠的IgM重鏈穩(wěn)定區(qū)則有475個氨基酸。所有種型抗體的輕鏈的可變區(qū)都是由一個單獨的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域組成的。每個免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域大約有110個氨基酸。IgD和IgG的重鏈大約包含450個氨基酸,而IgE和IgM的重鏈包含約550個氨基酸。每條輕鏈都包含一個穩(wěn)定的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域和一個可變的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域,其長度大約為211到217個氨基酸。通常IgG的分子量約為150KD。在還原的情況下,每條重鏈約為50KD,每條輕鏈約為25KD。人類的IgA2抗體,其重鏈和輕鏈之間沒有二硫鍵相互連接。IgM分子間通常會經(jīng)二硫鍵連接在一起,并傾向于以五聚體或六聚體的形式存在,因此其分子量可高達(dá)970KD。因為免疫球蛋白經(jīng)常被糖基化,因此其分子量也是不同的。有時,與其名義上的分子量會相差很大。
鼠抗種型的重要性
抗體的種型對于體內(nèi)的免疫應(yīng)答及其效應(yīng)機(jī)制的發(fā)揮極其重要。鼠IgG抗體對于免疫球蛋白體內(nèi)生物學(xué)功能的發(fā)揮也及其重要。不同種型的鼠IgG顯示出不同的抗菌性,并且當(dāng)與腦膜炎奈瑟氏菌外膜蛋白PorA的P1.16表位抗原發(fā)生反應(yīng)時,其調(diào)理吞噬性能也不盡相同。
多數(shù)抗體使用人員看起來不太注重抗體的類和亞類,這在蛋白免疫印跡和免疫沉淀實驗中確實無關(guān)緊要。但是在雙標(biāo)記實驗和流式細(xì)胞實驗中,遇到類似的關(guān)于二抗的問題,則必須考慮其類和亞類。
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