其實(shí)ELISA的原理及方法是較為簡(jiǎn)單的,相關(guān)ELISA操作的資料,網(wǎng)上一大堆,但是真正到自己上手的時(shí)候還是會(huì)犯糊涂。今天我們就來仔細(xì)說說這方面的問題,上海恒遠(yuǎn)技術(shù)解析:實(shí)驗(yàn)新手如何靈活運(yùn)用ELISA試劑盒?
1.對(duì)于一些小分子的檢測(cè),一般來說,要用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA去檢測(cè),也要購(gòu)買采用這個(gè)方法的盒子。一般細(xì)胞因子的檢測(cè),都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè),因?yàn)橐蜃臃肿恿勘容^大,一般10幾個(gè)KD左右,很容易找到兩個(gè)或者多個(gè)抗原表位。
而小分子很難找到兩個(gè)不同的表位,也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)記的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。
2.還有一個(gè)問題,這是不是客戶的誤區(qū),就是拿來一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè)。ELISA檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,靈敏度高,但是該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性,該做western的做western。
·特別說明
① ELISA試劑盒規(guī)格有96T和48T兩種,打開包裝后要及時(shí)檢查所有物品是否齊全完整。
② 一周內(nèi)使用可存于4℃,需長(zhǎng)時(shí)間存放或多次使用建議存于-20℃。
·上海恒遠(yuǎn)對(duì)ELISA的操作提醒:
① 將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
② 液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
③ 溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
④ 洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
⑤ 洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
另外,要想熟練的靈活運(yùn)用ELISA試劑盒,還需要多動(dòng)手多操作。今天是本周的zui后一個(gè)工作日啦,如果在明、后兩天中,您有需要了解的相關(guān)信息或者資料內(nèi)容,都可以在本公司中留言。上海恒遠(yuǎn)隨時(shí)歡迎!