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胎牛血清,胎牛血清熱滅活

更新時間:2022-08-27

簡要描述:

胎牛血清,胎牛血清熱滅活不含防腐劑;艾滋病、梅毒、乙肝、丙肝,四個標本檢測均為陰性。未滅活、未除菌。

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 一、胎牛血清,胎牛血清熱滅活”概述:

   采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。本產品無支原體、無牛病毒、無噬毒體、內毒素含量低于1EU/ml,適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制,是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。


二、“
胎牛血清,胎牛血清熱滅活使用前處理儲存條件

使用前處理:大部分血清在使用前必須滅活處理,即56℃30分鐘。滅活的目的是去除血清中的補體成分,避免補體對細胞產生毒性作用。血清經(jīng)過滅活也會損失一些對細胞有利的成分,如生長因子,因此也有人提出血清不經(jīng)滅活直接用于培養(yǎng),這樣做的前提是確認血清中不含補體成分。對于一些品質高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細胞培養(yǎng)。 
儲存條件:血清一般儲存于-20℃,同時應避免反復凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲存于-20℃,使用前融化。融化時現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時間存放,應盡快使用。

 三、操作問題:
如何避免沉淀物的產生?
1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生
3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56。C,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
四、“
”常見問題處理
1.血清應保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀龋俜呕乩鋬觥?nbsp; 
2.解凍血清先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。        
3.血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。 
4.加熱可以滅活補體系統(tǒng)。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養(yǎng)ES細胞、平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。 
5.做熱滅活有必要嗎?實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,更確保血清的質量! 
6.細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關: 
(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸 
(2)血清質量不好,反復凍融的結果 
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長 
(4)配制培養(yǎng)基的水質、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點 
(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除 

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