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羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒 微量法

更新時(shí)間:2023-03-20

簡(jiǎn)要描述:

恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機(jī)鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測(cè)樣本類型豐富,主要的檢測(cè)儀器為酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測(cè)服務(wù)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間,所有這些保證了我們向您提供的專業(yè)優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

型號(hào):點(diǎn)擊量:1275
中文名稱

羥自由基清除能力測(cè)定試劑盒

規(guī)格96樣
貨號(hào)

A-037-SH

價(jià)格面議
樣本類型血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等
檢測(cè)范圍詳見說明書
檢測(cè)方法

微量法

貨期3-5天
說明書咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻(xiàn)咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取


  正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。

測(cè)定原理

H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,將鄰二氮菲- Fe2+水溶液中Fe2+氧化為Fe3+ ,導(dǎo)致536nm吸光度下降,樣品對(duì)536nm吸光度下降速率的抑制程度,反映了樣品清除羥自由基的能力。


自備用品:

恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體100 mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體12mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體12 mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體6mL×1瓶,4℃保存。

樣品的制備:

1. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后10000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2. 血清、果汁等液體樣品可直接測(cè)定。

3. 提取物(或者藥物)可配制成一定濃度,如5 mg/mL。


操作步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至536nm。

2、 工作液配制:使用之前按照每管試劑一:試劑二:試劑三=100:50:100(µL)的比例配制,用多少配多少,混勻。

3、 EP管中加入如下試劑


空白管

對(duì)照管

測(cè)定管

工作液µL)

250

250

250

混勻,防止局部顏色過濃

樣品(µL)



50

試劑四(µL)


50

50

H2O(µL)

100

50


混勻,37℃保溫60min,8000g 25℃離心5min,吸取200μL于96孔板中測(cè)定536nm處吸光值,空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值分別記為A空、A對(duì)和A測(cè)。

注意:空白管和對(duì)照管只需測(cè)定一次。


計(jì)算公式:

羥自由基清除率 D% =(A測(cè)-A對(duì))÷(A空-A對(duì))×100%

A空、A對(duì)、A測(cè):空白管、對(duì)照管和測(cè)定管的吸光值。


注意事項(xiàng):

為了比較不同樣品羥自由基清除能力,對(duì)于同一批樣品必須加入等量的樣品,血清、組織勻漿、果汁等液體樣品加入同樣體積,提取物(或者藥物)配制成同樣濃度。




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