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人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物

更新時(shí)間:2022-08-11

簡(jiǎn)要描述:

上海恒遠(yuǎn)公司是國(guó)內(nèi)免疫學(xué)產(chǎn)品主要供應(yīng)商之一,提供各種原裝、分裝“人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物",質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,且售后服務(wù)完整,有任何試劑盒方面的問題都能幫您解決。免除您的后顧之憂。并提供免費(fèi)代檢測(cè),更好的為您服務(wù)。如有其他問題請(qǐng)及時(shí)。

型號(hào):人Hb-AGE試劑盒96人份/48人份點(diǎn)擊量:1043

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企業(yè)單位:上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商     產(chǎn)品單價(jià):請(qǐng)來電詢價(jià)()
人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物   Human hemoglobin-advanced glycosylation end products,Hb-AGE ELISA KIT   
產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份     保存條件:2-8℃
產(chǎn)地:美國(guó)
實(shí)驗(yàn)方法:
酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
檢測(cè)原理:
采用雙抗體夾心ABC-ELISA原理
操作步驟
     方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
  3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
  方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:   
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O?D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
 

 

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