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開學(xué)季,恒遠(yuǎn)告訴您ELISA技術(shù)參數(shù)之準(zhǔn)確度

更新時(shí)間:2017-09-08   點(diǎn)擊次數(shù):1671次

                         

一、ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度 
    通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗(yàn)及干擾試驗(yàn)的結(jié)果來分析判斷:
 1. 回收試驗(yàn) 回收率越接近100%,準(zhǔn)確率越高,一般以100%±5%為合格。
 2. 定值血清的測定 對于某些無法準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)物的試劑盒,可用低、中、高濃度的定值血清進(jìn)行測定,測得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格。
 3. 對照試驗(yàn) 將被檢試劑盒與*的參考方法同時(shí)測定若干樣本(一般要求100份,zui少需30份),計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程。
 4. 非特異性與干擾試驗(yàn) 對維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度,干擾值越小越好。

二、ELISA試劑盒精密度 
    試劑的瓶間差異、批內(nèi)精密度和批間差異三組測定的平均值之間應(yīng)無顯著差異,否則,試劑盒的均一性不符合要求:
1. 瓶間差異:同一試劑盒,取10瓶試劑復(fù)溶,測定同一樣品的含量,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。
2. 批內(nèi)精密度:同一樣品用同一瓶試劑測定10次,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)
3. 批間差異:同一樣品,用不同批號的10瓶試劑測定,求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)

三、線性范圍
    指該試劑盒按其說明使用時(shí)可準(zhǔn)確測量的范圍。被檢樣品的含量超出測定線性范圍,必須改變樣品與試劑體積的比例,重新測定才能得到準(zhǔn)確結(jié)果。試劑盒的測定線性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo),也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一。

四、抗干擾作用:雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點(diǎn)是抗干擾作用。

五、靈敏度:在終點(diǎn)法靈敏度以特定波長下1cm光徑時(shí)單位濃度的吸光度值表示。

六、穩(wěn)定性
·原包裝試劑的穩(wěn)定性;
·復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定性;
·不同溫度下的保存期。

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