近日有位客戶致電給我司業(yè)務(wù)員,抱怨ELISA試劑盒實驗太難,掌握不好,一不小心就毀了實驗。我司業(yè)務(wù)員表示,一定要有全面的準備,不能放棄,多加學(xué)習(xí)多加練習(xí),可以隨時的售后技術(shù)員指導(dǎo)。其實ELISA實驗并沒有那么難,今天我們一起來看上海恒遠揭曉:ELISA試劑盒技術(shù)員的實驗秘技
*、吸光度值偏高是怎會回事?
可能引起的原因有孵育的溫度過高、反應(yīng)的時間過長。相對應(yīng)的解決辦法是調(diào)整孵育環(huán)境的溫度,如無法調(diào)整室內(nèi)的溫度,請將顯色時間適當?shù)目s短、控制反應(yīng)時間。
第二、檢測的結(jié)果沒有吸光度值或吸光度值很低怎么辦?
首先我們來看下原因,可能引起的原因有試劑盒已過有效期、使用的試劑盒內(nèi)容物不是同一個批次的、沒加入酶標記物、試劑盒的內(nèi)容物沒有充分的回溫、孵育的溫度太低等,相對應(yīng)的解決辦法是更換成在有效期以內(nèi)的試劑盒、使用同~個批次的試劑盒的內(nèi)容物、按照試劑盒說明書中的步驟進行操作、將試劑盒的內(nèi)容物充分的回溫后再進行操作、在實驗操作的整個過程中請仔細觀察恒溫箱的溫度。
第三、陰性樣本的吸光度值低于陽性吸光度值的解決方案
可能引起的原因是出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象或酶標板孔中的試劑未充分的混合。解決的辦法是注意操作的方法,注意洗滌時的方法、加完試劑后可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30s,混勻液體。
第四、標準曲線的問題
線性不好,或平行性不好(雙孔對照孔的OD值差別很大),或出現(xiàn)跳孔的現(xiàn)象可能引起的原因有酶標板孔間相互污染、洗板后未能盡快進行下一步操作、添加樣品或其它試劑時操作的方法不對、孵育位置避光性不佳或蓋板膜沒有密封好使得水分蒸發(fā)、酶標板孔問加入的試劑量不同,相對應(yīng)的解決辦法是加樣時請小心勿將液體濺人另一孔中,人工洗板時也請小心,勿將洗滌液濺人另一微孔中、在洗板后及時進行下一步操作、添加試劑時請懸空滴入,切記勿將槍頭接觸到板孔內(nèi),吸取不同試劑瓶中的液體時就要更換一次槍頭、確認孵育環(huán)境不透光,蓋板膜將酶標板密封好、使用已校正過的微量加樣器,如將*次加入液體時槍頭上留有一滴的液體滴下,那么將以后槍頭上留有的液體也滴下,以保證加入液體體積的一致性。
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