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高品質(zhì)小鼠ELISA試劑盒的操作秘密

更新時(shí)間:2017-11-01   點(diǎn)擊次數(shù):2629次

    常有ELISA操作者抱怨實(shí)驗(yàn)復(fù)雜,而經(jīng)驗(yàn)豐富的老師們會(huì)覺得很簡(jiǎn)便,一是熟能生巧,二是掌握了其中的秘密。今天上海恒遠(yuǎn)帶您來看哪些個(gè)高品質(zhì)小鼠ELISA試劑盒的操作秘密吧:
 

● ELISA秘密重點(diǎn)之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進(jìn)行45加樣。在定性測(cè)定中有時(shí)不強(qiáng)調(diào)加樣量的準(zhǔn)確性,此時(shí)應(yīng)該使用相同口徑的滴管,保持準(zhǔn)確的加樣姿勢(shì),使每滴液體的體積基本相同。在定量測(cè)定中則加樣量應(yīng)力求準(zhǔn)確。標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液應(yīng)按規(guī)定配制。加樣時(shí)應(yīng)將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

 

● ELISA秘密重點(diǎn)之保溫:
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,此時(shí)反應(yīng)的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應(yīng)疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應(yīng)該是金屬的,傳熱容易。

 

● ELISA秘密重點(diǎn)之洗滌:
    洗滌在ELISA試劑盒過程中不是反應(yīng)聚,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。洗滌的目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法:

 

1.吸干孔內(nèi)反應(yīng)液;
 

2.將洗滌液注滿板孔;
   

3.放置2min,略作搖動(dòng);
 

 4.吸干孔內(nèi)液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗滌的次數(shù)一般為3~4次,有時(shí)甚至需洗5~6次。
● ELISA實(shí)驗(yàn)操作示意圖:
   
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