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高品質(zhì)小鼠ELISA試劑盒的操作秘密

更新時間:2017-11-01   點擊次數(shù):1361次

    常有ELISA操作者抱怨實驗復雜,而經(jīng)驗豐富的老師們會覺得很簡便,一是熟能生巧,二是掌握了其中的秘密。今天上海恒遠帶您來看哪些個高品質(zhì)小鼠ELISA試劑盒的操作秘密吧:
 

● ELISA秘密重點之加樣:
在ELISA試劑盒中除了包被外,一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調(diào)加樣量的準確性,此時應該使用相同口徑的滴管,保持準確的加樣姿勢,使每滴液體的體積基本相同。在定量測定中則加樣量應力求準確。標本和結(jié)合物的稀釋液應按規(guī)定配制。加樣時應將液體加在孔底,避免加在孔壁上部,并注意不可出現(xiàn)氣泡。

 

● ELISA秘密重點之保溫:
在ELISA試劑盒中一般有二次抗原抗體反應,即加標本后和加結(jié)合物后,此時反應的溫度和時間應按規(guī)定的要求,保溫容器是水浴箱,可使溫度迅速平衡。各ELISA板不應疊在一起。為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的濕盒中。濕盒應該是金屬的,傳熱容易。

 

● ELISA秘密重點之洗滌:
    洗滌在ELISA試劑盒過程中不是反應聚,但卻是決定實驗成敗的關鍵。洗滌的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標抗體作用而產(chǎn)生干擾。ELISA板的洗滌一般可采用以下方法:

 

1.吸干孔內(nèi)反應液;
 

2.將洗滌液注滿板孔;
   

3.放置2min,略作搖動;
 

 4.吸干孔內(nèi)液,也可傾去液體后在吸水紙上拍干。洗滌的次數(shù)一般為3~4次,有時甚至需洗5~6次。
● ELISA實驗操作示意圖:
   
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