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多肽純度的定義及含量

更新時(shí)間:2013-04-17   點(diǎn)擊次數(shù):2850次

多肽純度的定義
多肽的純度通常是通過(guò)HPLC,用每分鐘1%的標(biāo)準(zhǔn)乙腈梯度來(lái)檢測(cè)決定的。合成過(guò)程中,氨基酸之間的交聯(lián)效率不是總能達(dá)到100%,因而產(chǎn)生一系列的氨基酸缺失的雜質(zhì)。大多數(shù)這樣的氨基酸缺失的雜質(zhì)在純化過(guò)程中都被去掉了,但有少數(shù)的雜質(zhì)其色譜表現(xiàn)與目標(biāo)多肽很相近。這些氨基酸缺失的雜質(zhì)肽留在了多肽樣品中就構(gòu)成了余下的幾個(gè)百分點(diǎn)。

多肽的凈含量
干品多肽的重量中不僅僅包含多肽,還包含有一些非肽的組份,如水,被吸收的溶劑、配位離子和鹽等。肽的凈含量是指肽在其中的重量百分比,這個(gè)百分比的數(shù)值范圍很大,可能從50%到90%,取決于純度、序列以及合成和純化的方法,不要將肽的凈含量和肽的純度混為一談,它們是*不同的兩個(gè)概念。純度通常是由HPLC決定的。純度定義的是多肽樣品中含正確序列的組分的百分比,而肽的凈含量是指樣品中肽類物質(zhì)相對(duì)于總物質(zhì)所占的百分比,肽的凈含量通常是用氨基酸組分分析或紫外分光法測(cè)定的。這個(gè)信息主要是在一些對(duì)肽的濃度很敏感的實(shí)驗(yàn)中,對(duì)計(jì)算肽的濃度是很重要的。

MAP的應(yīng)用   ELISA試劑盒價(jià)格

MAP是復(fù)合抗原多肽,是將線型多肽的C端連接在多聚Lys核心上形成的分枝多肽,從而增大了整個(gè)分子的大小。雖然MAP減少了多肽與KLH交聯(lián)的步驟,然而由于MAP多肽的構(gòu)象活動(dòng)空間有限,通過(guò)它產(chǎn)生的抗體與通過(guò)KLH交聯(lián)法產(chǎn)生的抗體相比常常不能被蛋白識(shí)別。再者,做MAP時(shí)沒(méi)有自由的肽產(chǎn)生,因而很難除去對(duì)多聚Lys核心部分產(chǎn)生的抗體。HPLC純化MAP很困難。而且由于MAP分子的不均一性和很大的分子大小,也不能提供質(zhì)譜鑒定。

                 

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