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2015年ELISA試劑盒靈敏度的高低判斷

更新時(shí)間:2015-03-09   點(diǎn)擊次數(shù):1201次

    根據(jù)何的統(tǒng)計(jì)與調(diào)查,ELISA試劑盒被廣泛應(yīng)用的原因主要有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多因素。但這些優(yōu)點(diǎn),并非全部的試劑盒都有具備,今天我們就一起來看看2015年ELISA試劑盒靈敏度的高低判斷。

    其實(shí),ELISA靈敏度和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。

    一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S"型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。

    雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測(cè)的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測(cè)所檢測(cè)的待測(cè)物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子,那么理論推測(cè)酶活性放大ELISA方法的zui低檢測(cè)限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達(dá)不到這個(gè)水平(大于104個(gè)分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。

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