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人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)

更新時間:2022-08-10

簡要描述:

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【產(chǎn)品中文名稱】:人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)

【產(chǎn)品英文名稱】:Human Matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA KIT

【產(chǎn)   裝】:96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測 科研試劑

【經(jīng)營品牌】:RD RB、 IBL

【保存條件】:2-8

【供應(yīng)商】:上海恒遠(yuǎn)生物國內(nèi)供應(yīng)商

【檢測標(biāo)本標(biāo)本】:血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用

 ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)注意事項
  1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
  2. 在ELISA中,進(jìn)行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
  (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
  (2) 包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用
41824小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.11.010μgml進(jìn)行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為110μgml。
  (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定見酶標(biāo)記抗體部份。然后再固定其它條件或采取方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
  (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體OPD有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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