更新時間:2022-08-11
“人泛素蛋白D"ELISA方法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷,也應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定。
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【產(chǎn) 品 名 稱】:人泛素蛋白D
【英 文 名 稱】:Human ubiquitin D,UBD ELISA KIT
【經(jīng) 營 品 牌】:RD 、 RB、 IBL,提供免費待測服務!
【產(chǎn) 品 包 裝】:96T/48T
【保 存 條 件】:2-8℃
【供應 商】:上海恒遠ELISA試劑盒供應商(國內(nèi)供應商)
【檢測標本標本】:血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用
原理
ELISA是以免疫學反應為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
試劑器材
1. 試劑
?。?) 包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):
NaCO31.59克 NaHCO3 2.93克 加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M KH2PO4 0.2克 Na2HPO4?12H2O 2.9克 NaCl 8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05% 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液:牛血清白蛋白(BSA) 0.1克 加洗滌緩沖液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5~10%使用。
?。?) 終止液(2M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml 0.1M 檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml 加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml底物緩沖液(PH5.5) 10ml0.75%H2O2 32μl
?。?) ABTS使用液:ABTS 0.5mg 底物緩沖液(PH5.5) 1ml 3%H2O2 2μl
?。?) 抗原、抗體和酶標記抗體。
?。?) 正常人血清和陽性對照血清。
2. 器材:
?。?) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
?。?) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
?。?) 4℃冰箱,37℃孵育箱。
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