大家經(jīng)常會討論移液的問題,這個步驟在ELISA實驗中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時候是定量的,產(chǎn)生氣泡可能會對實驗結果影響蠻大的。總之,掌握微量加樣器加樣必須注意的關鍵點是可以幫助您在實驗中避免不必要的麻煩。恒遠為您解析ELISA加樣時移液槍的正確使用方法。
1.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應液界面有差異。
2.試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很容易出現(xiàn)重復滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附,從而引起非特異顯色。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致.